線粒體膜電位熒光探針JC-10

保存條件 Store at -20℃, protect from light.

線粒體膜電位檢測試劑盒（JC-10 ）是一種以JC-10 為熒光探針，快速靈敏地檢測細胞、組織或純化的線粒體膜電位變化的試劑盒，可以用于早期的細胞凋亡檢測。

JC-10 是一種廣泛用于檢測線粒體膜電位△Ψm 的理想熒光探針?？梢詸z測細胞、組織或純化的線粒體膜電位。在線粒體膜電位較高時，JC-10 聚集在線粒體的基質中，形成聚合物，可以產生紅色熒光；在線粒體膜電位較低時，JC-10 不能聚集在線粒體的基質中，此時 JC-10 為單體，可以產生綠色熒光。這樣就可以非常方便地通過熒光顏色的轉變來檢測線粒體膜電位的變化。常用紅綠熒光的相對比例來衡量線粒體去極化的比例。

線粒體膜電位的下降是細胞凋亡早期的一個標志性事件。通過 JC-10 從紅色熒光到綠色熒光的轉變可以很容易地檢測到細胞膜電位的下降，同時也可以用JC-10 從紅色熒光到綠色熒光的轉變作為細胞凋亡早期的一個檢測指標。

JC-10 單體的最大激發(fā)波長為 515nm ，最大發(fā)射波長為529nm ；JC-10 聚合物的最大激發(fā)波長為585nm ，最大發(fā)射波長為590nm 。實際觀察時，使用常規(guī)的觀察紅色熒光和綠色熒光的設置即可。

線粒體膜電位熒光探針JC-10

JC-10性質：

　　1. 分子量：~600Da

　　2. 純度：≥95% （HPLC）

　　3. 儲存條件：-20℃干燥避光保存，有效期一年。

　　4. 染色過程：

　?。?） 用DMSO將JC-10溶解，制得3mM的JC-10溶液（2mg/mL）。

　　注：建議分裝，任何未使用的小瓶應儲存在

<-20℃。避免反復凍融循環(huán)，并避光.

　?。?） 準備1X JC-10工作溶液：在實驗當天，解凍一份JC-10 stockolution到室溫。用Hanks和20 mM Hepesbuffer（HHBS）或您選擇的緩沖液（pH 7-8）稀釋制備10-30μM 1X工作溶液。通過votexing將它們混合均勻。

　　（3） 準備測試用細胞模型（例如細胞凋亡模型），離心細胞，每管取1-5×10^5個細胞。

　?。?） 將細胞重懸于500μLJC-10工作溶液中。

　?。?） 在室溫或37°C，5％CO2培養(yǎng)箱中孵育10至30分鐘，避光。注意：適當的孵育時間取決于所使用的單個細胞類型和細胞濃度?？蓢L試優(yōu)化每個實驗的孵育時間。

　　（6） 使用熒光顯微鏡（使用FITC和TRITC通道）或流式細胞儀（使用FL1和FL2通道）監(jiān)測Ex / Em = 490/525 nm和540/590 nm處的熒光變化。

　　注意事項：

　　為了您的安全和健康，請注意適當防護。

　　JC-10 探針裝載完并洗滌后盡量在 30 分鐘內完成后續(xù)檢測。

線粒體膜電位熒光探針JC-10